جداسازی اندام تولید سم و روش استخراج و شناسایی کونوتوکسین‌ها در حلزون‌ مخروطی Conus terebra thomasi

حلزون‌های مخروطی (Conus) گروهی از نرم‌تنان دریایی هستند که به‌منظور اهداف متفاوت، ترکیبات سمی (کونوتوکسین‌ها) را تولید می‌کنند. در مطالعات متعددی خواص دارویی کونوتوکسین‌ها و وجود ترکیبات سمی متفاوت در بخش‌های مختلف اندام مولد سم در گونه‌های مختلف بررسی شده است. شناخت ساده‌ترین و مناسب‌ترین روش برای جداسازی اندام تولید سم و استخراج کونوتوکسین‌ها ضروری به نظر می‌رسد. بدین منظور تعدادی گونه‌ی Conus terebra thomasi از سواحل بخش‌های شمالی جزیره‌ی لارک (خلیج فارس) جمع‌آوری و صدف نمونه‌ها بوسیله‌ی گیره‌ی آهنی به آرامی شکسته شد. بعد از خارج سازی حیوان از صدف، خارج سازی دستگاه مولد سم با ایجاد یک برش کوچک در منطقه‌ی پشتی عضله‌ی پا انجام شد. دستگاه مولد سم با دقت به 3 بخش حباب سم، بخش ابتدایی مجرا و بخش انتهایی مجرای سم تقسیم و فریزدرای شدند. عصاره‌گیری با 3 حلال مختلف (استون خالص، مخلوط استون خالص- متانول20% و بافر فسفات نمکی) انجام و میزان پروتئین کل با روش برادفورد اندازه‌گیری شد. نتایج نشان داد که میزان پروتئین کل در دو عصاره‌ی استونی و استونی متانولی بسیار کم و در حلال بافر فسفاتی قابل ملاحظه (حباب سم: 79/38، بخش ابتدایی مجرا: 4/52 و بخش انتهایی مجرا: 01/46 میلی‌گرم/گرم بافت خشک) است. با استفاده از روش الکتروفورز عمودی کونوپپتیدهای مختلفی در بخش‌های مختلف دستگاه مولد سم مشاهده شد. همچنین بین حلال‌های بررسی شده، بافر فسفات نمکی مناسب معرفی می‌شود که علاوه بر بالا بودن کونوپپتیدهای استخراجی، احتمال آسیب دیدگی آنها از بین رفته و مناسب برای بررسی خواص زیست فعالی آنها خواهد بود.